Artemisia artemisinin, extrakcia, malária OBSAH V ARTEMISII ANNUA L VÝLETY PRIJATÉ RÔZNYMI METÓDAMI

OBSAH ARTEMIZININU V ARTEMISII ANNUA L VÝLETY ZÍSKANÉ RÔZNYMI Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Štátna univerzita Padnaeed Buryat, st. Smolin, 24a, Ulan-Ude (Rusko) Tomská štátna univerzita, 36, Lenina Ave, Tomsk (Rusko) Baikal Institute for Nature Management, Sibírska pobočka Ruskej akadémie vied, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Rusko)

Zvážia sa otázky týkajúce sa izolácie artemisinínu z Artemisia annua L. a jeho kvantitatívne stanovenie metódou HPLC-MS. Artemisinín bol izolovaný rôznymi extrakčnými metódami: maceráciou, ultrazvukom a subkritickou extrakciou CO2. Zloženie zloženia CO2 a hexánových extraktov bolo študované pomocou GC-MS.

úvod

Artemisinin (1) je peroxid seskviterpénu [1], ktorý je vysoko účinným antimalarickým liečivom a prekurzorom silnejších zlúčenín, ako je artemether, artesunát a niektoré ďalšie. Význam artemisinínu a jeho derivátov je založený na veľmi rýchlom pôsobení zlúčeniny tohto typu proti hlavnému patogénu Plazmodium falciparum, ktorý tiež spôsobuje ochorenie mozgu. Chemická a biochemická syntéza artemisinínu sa ukázala ako veľmi drahá, a preto v súčasnosti nie je životaschopná ako hlavný zdroj produkcie artemisinínu [2].

Malária je spôsobená mikroorganizmom - Plasmodium malária. V ľudskom tele existujú 4 typy takýchto plazmidov, parazitické: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae a P. falciparum. V polovici XX storočia, vďaka rozšíreniu chinínu a jeho derivátov, bolo možné výrazne znížiť počet pacientov s maláriou. Avšak od 60. rokov. malária opäť pripomínala. Dôvodom bola skutočnosť, že v Thajsku a Južnej Amerike sa malária Plasmodium (P. falciparum), rezistentná na chinín, chlorochín, meflochín a iné liečivá na báze chinolínu, objavila a rozšírila v iných regiónoch [3, 4]. Problém nájdenia nových účinných antimalarických liekov, medzi ktorými bol navrhnutý artemisinín, sa stal aktuálnym. Táto unikátna zlúčenina bola objavená v Číne (čínske meno je qinghaosu). Práce sa začali v roku 1967 a nazývali sa „Program 523“ [5]. Je izolovaný z paliny ročnej Atemisia annua L., ktorá je distribuovaná na území bývalého ZSSR, pokrývajúca oblasti Altaj, Transbaikália, Amurska oblasť, Kazachstan, Kirgizsko, Uzbekistan a Turkménsko. Palina je široko zastúpená v Číne a ďalších krajinách [6]. Celkové množstvo artemisinínu izolovaného z rôznych častí A. annua je približne 0,01 a 1,4% hmotnosti suchého listu [2].

Artemisia annua L. je hlavnou surovinou na produkciu artemisinínu. Svetová zdravotnícka organizácia v roku 2001 odporučila použitie artemisinínu v terapii prvej línie na kontrolu malárie, čo viedlo k zvýšeniu plochy pod jednoročné drevo. Pšenica sa pestuje prevažne vo východnej Ázii, najmä v Číne a vo Vietname (70% výmery zo svetových zásob), ktorá sa nedávno zaviedla do kultúry vo východnej a južnej Afrike (20% rozlohy svetových zásob), čo poskytuje štvrtinu celosvetových zdravotných potrieb. [7].
Okrem artemisinínu je A. annua cenený aj pre svoj esenciálny olej, ktorý má charakteristickú sladkú, trávnatú arómu a používa sa vo parfumérii a kozmetických výrobkoch. Okrem toho má olej antibakteriálne vlastnosti a môže byť použitý na liečbu kožných ochorení. Okrem seskviterpénových laktónov, ktoré majú hlavnú terapeutickú hodnotu, esenciálne oleje tejto rastliny obsahujú významné množstvo zložiek, ktoré majú hodnotu, ako napríklad 1,8-kineolín, alkoholický alkohol a ketón, borneol a ďalšie. tiež analyzoval fyziologický účinok lipofilných extraktov na kožu [2].
V súvislosti s bohatým a rôznorodým zložením biologicky aktívnych látok obsiahnutých v Artemisia annua je veľký záujem o hľadanie nových oblastí rastu ročného paliny. V Republike Buryatia rastie 46 druhov polynum [8], vrátane Artemisia annua L. Obsah artemisinínu v Poľsku, jednoročného, rastúceho v Burjatsku, nebol predtým študovaný. Cieľom tejto práce bolo preto kvantitatívne stanovenie artemisinínu v extraktoch získaných rôznymi extrakčnými metódami.

Experimentálna časť

Surovinou pre túto štúdiu bola vybraná nadzemná časť poľského ročníka Artemisia annua L., zozbieraného v prvej dekáde augusta 2010, vo fáze kvitnutia.
Izolácia artemisinínu a iných biologicky aktívnych látok (esenciálny olej) sa uskutočnila s použitím rôznych extrakčných metód: macerácie, ultrazvukovej extrakcie a subkritickej extrakcie CO2. Extrakcia sa uskutočňovala na laboratórnych zariadeniach. Ako extrakčné činidlá sa použili hexán, etylacetát, etanol a C02. Údaje a extrakčné parametre sú uvedené v tabuľke 1. Extrakty zo zrazeniny sa oddelili centrifugáciou v centrifúge OP-8UHL4.2 pri 5000 ot / min a potom sa prefiltrovali cez systém filtrácie vzoriek.
Kvantifikácia artemisinínu sa stanovila pomocou HPLC-MS s použitím vysokoúčinného kvapalinového chromatografu Finnigan Surveyor vybaveného autosampler Plus autosamplerom a čerpadlom LC Pump Plus s detektorom LCn Advantage MAX (iónová pasca) Finnigan, ionizačná metóda - elektrosprej. Kolóna "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, naplnená sorbentom na silikagéli s fázami očkovanými C18 (veľkosť častíc 5 μm), (vyrába Thermo electronic corporation, USA). Elúcia sa uskutočňuje v izokratickom režime (50% (A): 50% (B)), zloženie východiskového pufra (A) je vodný roztok kyseliny mravčej (pH = 3) + 2 ml nasýteného roztoku octanu amónneho, elučný pufor (B) - 100% acetonitrilu. Objemová prietoková rýchlosť eluentu je 0,5 ml / min, objem injektovanej vzorky (autosampler) je 25 μl. Iónová registrácia sa uskutočňovala v režime monitorovania kladne nabitých iónov (Selected Ion Monitoring, SIM) s molekulovou hmotnosťou 300 (v dôsledku pridania amónneho iónu NH4 do molekuly artemisinínu) s šírkou okna (299-301) m / z. Kvantitatívne stanovenie sa uskutočnilo s použitím metódy vnútorného štandardu s použitím štandardnej štandardnej vzorky od Sigma.

Extrakčné metódy a parametre

Č. P / p Metóda extrakcie Extrakčný extrakčný čas / extrakčné parametre Obsah artemisinínu v%, vyjadrený ako a.s.s.
1 Macerácia etanolu 24 h / suroviny: pomer rozpúšťadla (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Maceračný etanol 48 h / suroviny: pomer rozpúšťadla (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Macerácia hexánu 24 h / pomer vzorky: rozpúšťadlo (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Ultrazvukový extrakčný etanol 15 min / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), ozvučovacia frekvencia 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Ultrazvukový extrakčný etylacetát 15 min / suroviny: pomer rozpúšťadla (1: 5), frekvencia ozvučenia 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 extrakcia CO2 so2 24 h / prietok 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Prchavé zložky extraktov CO2 a hexánu sa ďalej skúmali pomocou chromatografickej hmotnostnej spektrometrie na plynovom chromatografe Agilent Packard HP 6890 s kvadrupólovým detektorom MSD 5973N. Použili sme 30-metrový kremenný stĺpec TR-5 ms s vnútorným priemerom d = 0,25 mm, hrúbkou filmu 0,25 μm. Chromatografická separácia sa uskutočnila tak, ako je opísané v [9]. Zložky extraktov boli kvalitatívne stanovené porovnaním celkových hmotnostných spektier s údajmi chromatografu s hmotnostnými spektrometrickými údajmi prchavých látok rastlinného pôvodu A. Tkachev, knižnice NIST 08 a Wiley 275. Výsledky analýzy sú uvedené v tabuľke 2.

Hlavné zložky CO2 a hexánových extraktov
Vzťažná plocha relatívna Pripojenia Peak relatívna plocha
Zlúčeniny extraktu hexánového extraktu CO2
Extrakt CO2 extrakt hexánu
Monoterpenoidy s dlhým reťazcom uhľovodíkov
Tricykcylén 140181 - trikozán 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosane 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-heptakozán 279800 132358
3-karen

Cyklické uhľovodíky
limonen
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7,5,0,0 (2,8).0 (5,14).
1,8-cineol 133599 - (7.11)] tetradekán
Artemisia ketón 1413437 - 1,8-dimetylfenantrén 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornylacetát

diterpenoidov
sesquiterpenoids
Metyl-3,5-bis (etylamino) benzoát 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Karyofilén oxid
Germacren D 214913 -
R-Selinén 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Diskusia o výsledkoch

Ako je možné vidieť z údajov uvedených v tabuľke 1, najnižší výťažok artemisinínu bol (0,022%) s ultrazvukovou extrakciou etylacetátom. Obsah artemisinínu v extraktoch izolovaných extrakciou ultrazvukom a maceráciou s použitím rôznych rozpúšťadiel (hexán, etylalkohol) sa významne nelíši 0,038-0,040% v zmysle A. p. Pri trvaní ročného množstva etylalkoholu počas 24 a 48 hodín je obsah artemisinínu v získaných extraktoch približne rovnaký ako 0,040 a 0,038%. Najvyšší výťažok artemisinínu (0,054%) bol získaný počas predkritickej extrakcie CO2. Pre porovnanie uvádzame niektoré údaje o obsahu artemisinínu v jednoročnom palive, ktoré rastie na rôznych územiach. Artemisia annua L., ktorá rastie v rôznych častiach Číny, obsahuje od 0,01 do 0,22% artemisinínu. Niektoré hybridy jednoročného paliny pestovanej v Číne a vo Vietname obsahujú od 1,0 do 1,5% artemisinínu [10]. Obsah artemisinínu v A. annua, ktorý rastie na území bývalého ZSSR, je nasledovný (hodnoty sú vyjadrené ako suroviny sušené na vzduchu): gruzínska SSR (0,005%), Kyrgyzská SSR (0,025%), moldavská SSR (0,01-0,02%), Územie Krasnodar (0,04%), ukrajinská SSR (0,005-0,05%), Turkménsko (0,05% z hľadiska a.s.c.), Kazachstan (0,01-0,05% z hľadiska A.S.S.) [11].
V štúdii zloženia extraktov ročného paliny získaného extrakciou CO2 a maceráciou, keď sa hexán použil ako extrakčné činidlo, chromatografia-hmotnostná spektrometria odhalila významné rozdiely v zložení týchto extraktov. Metódou hmotnostnej spektrometrie sa detegujú monoterpenoidy, seskviterpenoidy, uhľovodíky s dlhým reťazcom, cyklické uhľovodíky a diterpenoidy.
Monoterpenoidy sa nachádzajú len v CO2 extrakte. Hlavnými zložkami CO2 extraktu sú a-pinén, 3-karen, artemisia ketón, (3-selén, tricozen-1, 1,8-dimetylfenantrén a fluorén.

V hexánovom extrakte paliny ročnou plynovou chromatografiou - hmotnostnou spektrometriou boli identifikované hlavne uhľovodíky s dlhým reťazcom a cyklické uhľovodíky, 3-selén bol detegovaný zo seskviterpenoidov.
Okrem artemisinínu, ktorý má primárnu medicínsku hodnotu, obsahuje éterický olej veľké množstvo zložiek biologickej hodnoty, ako je artemisia ketón, 1,8-cyneol, borneol atď.

zistenie

1. Obsah artemisinínu v rôznych extraktoch A. annua (vzdušná časť, fáza kvitnutia) rastúcich na území Republiky Burjatsko bol stanovený pomocou HPLC-MS.
2. Maximálny obsah artemisinínu sa nachádza v extrakte CO2 (0,054% z hľadiska a.s.c.),
3. Pomocou chromatografickej hmotnostnej spektrometrie sa študovalo zloženie éterického oleja extrahovaného rôznymi extrakčnými metódami.

Artemisia annua L.
Opis taxónu

Ruské mená

taxonómie

obraz

Rastliny na mape

Botanický opis

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. v Nouv. Mem. Soc. Nat. MOZ. III, 81; Dc. Predrať. VI, 119; LDB. Fl. Ross. II, 592; Boiss. Fl. alebo. III, 371; Maxim. v Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Hook. Fl. Br. Ind. III, 323; Com. v fl. Manchu. III, 659; Nakai, Fl. Korean. II, 30; Fedch. Adyge. sol. Turk. IV, 200; Rydb. North Am. Fl. 34, časť 3, 259; Pampan. v Nuove. Giorno. Bot. Talian. N.S. XXXIV, 637; Hall a Clem. Artem (1923) 102; Com. a alice. Res. sol. Ďaleký východ Kr. II, 1036; Krasheniny. v fl. juhovýchod. Europ. Časť USSR, VI, 357; Grossg. Fl. Kavka. IV, 138; Krasheniny. a Wings. Fl. Zap. Súrodenec. XI, 2816; Polyak. v Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. v Tr. Petersburg University. topánok. Záhrada, X, 87; Fedch. op. Op. - Ic: Amm. Stirp. rar. t. 193, f. 23; Gmel. Fl. súrodenec. II tab. 25. - Exs.: ГРФ № 3152. - Jednoročné drevo.

Ročný. Rastlina je voňavá, zelená, holá alebo s rozptýlenými, malými, priľahlými chĺpkami, s rovnými, rebrovanými, hnedastými alebo purpurovo hnedastými stonkami vysokými 30–100 cm. listy sú bodkované-fossa-ferruginous, nižšie stopkaté, 3-5 cm dlhé. a 2-4 cm široká, oválna, trojnásobná, segmenty posledného rádu podlhovasté, krátko špicaté; celé alebo s 1-2 zubami, 1-2 mm dlhé. a 0,5 mm široký; Stredné a stonkové listy sú dvojité pinnate, horné priliehajúce, menšie a menej zložité, horné listy sú jednoduché alebo s malým počtom bočných lalokov. Koše sú guľaté, 2-2,5 mm široké, početné, odmietnuté alebo zvislé, na krátkych končatinách, ťahané spoločne na krátke konáre, b. m. dlhé pyramídové kvety; obal je hladký, vonkajšie letáky sú lineárne podlhovasté, zelené, vnútorné oválne alebo takmer okrúhle, so široko lemovaným lesklým okrajom okolo okraja; nádoba vypuklá, holá; okrajové kvety, 10–20 v počte, korunkové filiformy, bodkovité, úzko lineárne, stigmatické laloky, tupé, odkryté z trubice; disk kvety sú bisexuálne, 12-30 v počte, úzko-limitovaný tubulárny, nahý; peľnice úzko lineárne, horný prívesok podlhovastý, akútne šikmý, bazálne laloky veľmi krátke, špicaté; stĺpec je kratší ako tyčinka, stigma stigmy je lineárna, priama, mierne vybočená, na vrchole stvrdnutá; achenes 0,8 - 0,6 mm dlhé, podlhovasté oválne, ploché, na vrchole s malou zaoblenou plošinou, sotva hranami pozdĺž okraja. Col. VIII - IX.

V miestach buriny v blízkosti bývania, záhrad, v záhradách. - Európa. h.: Horný Dnereter., Horné Dneper., Volzh, Don., Volha, Dolný, Don., Čierny., Bess., Krym; Kaukaz: Zap.- a východ. Trans., Tal., St. Ázia: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. Al., Amu-Dar., Horn. Turkmen. Tot. var Heb., Srediz., Balk -Maloaz., Arm-Kurd., Irán, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolsko, North. Amerika (cudzinec).

Typom pohľadu sú kresby Ammana a Gmelina.

Domácností. VAL. Výnos esenciálneho oleja je 0,1 - 0,64% (podľa Goryaeva). Podľa Joshikazu Imade (1937) sú v oleji cineol a látka C10H6O; táto látka bola podrobne študovaná Ashaniou a Joshitomim (1917); spolu s artemacyaketónom bol v oleji nájdený jeho izomér izoartemisieacetón. Tento ketón bol schopný izolovať z materského lúhu, ktorý zostal pri príprave artemacyacetónového semikarbosonu. Seisi Takagi (1928), pokračujúc v štúdii japonskej A. annua, so 4 zložkami, ktoré sú známe v oleji, pridali ďalšie 2 nové: kdinofén a karyofilén. Na základe výskumu Rutovského a Vinogradova (1929) sa olej skladá z α-pinénu, cyneolu, kamfénu, artemisiaketónu a izoartemisieseketónu, malého množstva borneolu, kyseliny octovej a kyseliny maslovej, kimunoaldehydu (pravdepodobne semikarbozónu) a fenolu (pravdepodobne eugenolu). Malé množstvo alkaloidov sa našlo v podzemných častiach (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Podľa pozorovaní v teréne (Yunatov, 1954), v zelenom stave nie je jedený hospodárskych zvierat. Prítomnosť alkaloidov je potvrdená M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Abstrakt a dizertačná práca o medicíne (04/14/02) na tému: Farmakognostická štúdia Artemisia annua L. a Artemisia sieversiana Willd. flóry Burjatska

Abstrakt dizertačnej práce v medicíne na tému Farmakognostická štúdia Artemisia annua L. a Artemisia sieversiana Willd. flóry Burjatska

Ako rukopis

Soktoeva Tuyana Erdemovna

FARMAKOGNOSTICKÝ VÝSKUM ARTEMISIA ANNUA L. A ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLYORY BURYATIA

04/14/02 - farmaceutická chémia, farmakognózia

Abstrakt dizertačnej práce pre titul kandidáta farmaceutických vied

Disertačná práca bola vykonaná vo Federálnom štátnom rozpočte Vzdelávacie zriadenie vyššieho odborného vzdelávania „Štátna univerzita Buryat“ Ministerstva školstva a vedy Ruskej federácie a zriadenie Ruskej akadémie vied Bajkalského inštitútu environmentálneho manažérstva, sibírskej pobočky Ruskej akadémie vied

Školiteľ: Doktor chemických vied, profesor

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Oficiálni oponenti: Doktor biologických vied, profesor

Antsupova Tatyana Petrovna

Kandidát farmaceutických vied Mongolov Hanhai Purbuevich

Vedúca organizácia: Perm State

Ministerstvo zdravotníctva a sociálneho rozvoja Ruskej federácie

Obrana sa uskutoční 23. decembra 2011 o 10.00 hod. Na stretnutí Dissertation Council DM 003.028.02 na Ústave všeobecnej a experimentálnej biológie SB RAS na adrese: 6, Sakhyanova St., Ulan-Ude, 670047.

Disertačná práca je dostupná v Ústrednej vedeckej knižnici Buryatského vedeckého centra SB RAS.

Abstrakt publikovaný 22. novembra 2011.

Vedecký tajomník Dissertation Council Kandidát biologických vied

VŠEOBECNÝ OPIS PRÁCE Relevantnosť témy. Rastliny rodu Artemisia (palina) sú sľubnými zdrojmi biologicky aktívnych látok, ako napríklad palina obyčajná Artemisia dracunculus L., palina Artemisia absinthium L., palina obyčajná Artemisia vulgaris L. je široko využívaná v ľudovom, tradičnom a potravinárskom priemysle. Artemisia annua L., ročná palina, sa úspešne zaviedla do kultúry v mnohých krajinách av roku 2001 ju WHO odporučila ako hlavný zdroj artemisinínu, prvej línie liečby malárie. Krajiny produkujúce artemisinín dnes poskytujú približne štvrtinu globálnych zdravotných potrieb (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). Z jednoročného jedince sa izolovalo 137 biologicky aktívnych zlúčenín, vrátane 40 seskviterpénov, 10 triterpénov, 7 kumarínov, 46 flavonoidov, ktoré môžu slúžiť ako základ pre vývoj liekov (Bhakuni, 2001). V 80. rokoch 20. storočia sa skupina vedcov (Schroeter, 1989) pokúsila pestovať divo rastúcu časť jednoročnej flóry ZSSR v Moskve. V súčasnosti sa na Tomskej štátnej univerzite uskutočňujú rozsiahle práce na zavedení prvého ročníka. V Burjatsku n. Ročný je voľne rastúci druh.

Spolu s ročným parazitom v Burjatsku je potočnica Sivers Artemisia sieversiana Willd rozšírená, čo je tiež sľubný druh. Tráva Seabera obsahuje flavonoidy, esenciálny olej, kumaríny (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Esenciálny olej z morských živočíchov je zaujímavý ako zdroj chamazulénu, netoxickej zlúčeniny s protizápalovými, baktericídnymi, regeneračnými účinkami (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Doteraz sa podrobná chemická štúdia pstruha potočného a paliny ročnej flóry Burjatska neuskutočnila ako sľubný zdroj biologicky aktívnych látok, preto je ich štúdium naliehavou úlohou.

Cieľ štúdie: Farmakognostická štúdia pižma Sivers Artemisia sieversiana Willd. a palina ročná Artemisia annua L. ako cenné zdroje biologicky aktívnych látok.

Na dosiahnutie tohto cieľa je potrebné riešiť tieto úlohy:

1. Identifikovať anatomické a diagnostické príznaky vzdušnej časti Sivers a P. jeden rok starý na stanovenie ukazovateľov merchandisingu

surovín, zhodnotiť zásoby a možnosť zberu p. jeden rok a p. Siversa na území Republiky Burjatsko;

2. Preštudovať chemické zloženie hlavných skupín biologicky aktívnych látok týchto rastlín a určiť ich kvantitatívny obsah, stanoviť lokalizáciu éterických olejov a artemisinínu v jednotlivých častiach rastlín, študovať dynamiku ich akumulácie vo vývojových fázach a určiť optimálne podmienky zberu;

3. vyvinúť metódu na kvantitatívne stanovenie artemisinínu v nadzemnej časti jedného roka;

4. Určiť ukazovatele kvality a štandardy pre obsah základných biologicky aktívnych látok, vypracovať regulačnú dokumentáciu pre liečivé suroviny - trávu potokov Sivers a trávu ročného paliny.

Vedecká novosť. Boli stanovené hlavné diagnostické znaky trávy Sivers a P. ročné, boli vyvinuté numerické ukazovatele potrebné pre štandardizáciu surovín.

Bola uskutočnená štúdia chemického zloženia trávy Sivers a trávy jednoročnej. Stanovil sa obsah éterických olejov, flavonoidov, mastných kyselín, makro a mikroelementov. Flavonoidy - luteolín-7-glukozid, rutín, kvercetín a chryoeriol boli v týchto rastlinách detekované metódou HPLC-MS. Hlavnými mastnými kyselinami v študovaných typoch paliny sú palmitová, linolová, linolénová, 10% kyselina octadekenová sa nachádza aj vo významnom paline.

Boli stanovené podmienky pre extrakciu artemisinínu (typ extrakčného činidla, extrakčná metóda, čas extrakcie) z jednoletej byliny a zistilo sa, že maximálna extrakcia artemisinínu sa dosahuje ultrazvukovou a subkritickou extrakciou CO2. Pomocou HPLC-MS sa zistilo, že najväčšie množstvo artemisinínu v jednom roku je obsiahnuté vo fáze kvitnutia v kvetenstvách.

Študoval dynamiku akumulácie esenciálneho oleja v závislosti od fázy vývoja a časti závodu. Najväčšie množstvo chamazulénového esenciálneho oleja p. Siversa sa hromadí vo fázach pučania a kvitnutia v kvetenstvách.

Stanovené ukazovatele kvality BAS zahrnuté v regulačných dokumentoch.

Praktický význam. Rezervy a možný ročný objem obstarávania sídla Sivers a jednoročného vyrovnania na území Republiky Burjatsko (vysporiadanie riečnych osád - od 0,1 do 73,7 ton ročne a vyrovnanie jedného roka - od 1,2 do 122,3 ton ročne).

Bola vyvinutá technika na kvantitatívne stanovenie artemisinínu v p. Grass pomocou každoročnej HPLC-MS metódy. Podmienky na prípravu vzoriek surovín na analýzu na kvantitatívne stanovenie artemisinínu sú vedecky podložené.

Bola vykonaná štandardizácia surovín, boli vyvinuté projekty FS - „Sivers Wormwood Herbal“ a „Wormwood One-Year Grass“.

Stupeň implementácie. Metóda extrakcie údajov o esenciálnych olejoch a mikroskopických analýzach bola testovaná a zavedená do vzdelávacieho procesu Katedry farmácie na Štátnej rozpočtovej vzdelávacej inštitúcii vyššieho odborného vzdelávania „Štátna univerzita v Burjatsku“ (zákon o implementácii č. 1 zo 6. septembra 2011). Projekty FS na tráve paliny Sivers a jednoročného paliny sú pripravené na zváženie.

K obhajobe sú vzaté:

• výsledky štúdie anatomickej štruktúry, zásob, kritérií pravosti Sivers a P., rastúcich v Burjatsku;

• výsledky chemickej štúdie biologicky aktívnych látok a ich sezónna dynamika akumulácie;

• výsledky štúdií o štandardizácii nadzemnej časti Sivers p.

Schválenie práce. Hlavné ustanovenia diplomovej práce boli prezentované a prediskutované na: vedecko-praktickej konferencii s medzinárodnou účasťou „Rozvoj tradičnej medicíny v Rusku: skúsenosti, výskum, perspektívy“ (Ulan-Ude, 2010); 7. zimné simulácie o chemometrii "Moderné metódy analýzy dát" (Saint-Petersburg, 2010); medzinárodná vedecká konferencia venovaná 15. výročiu Štátnej univerzity Buryat "Aktuálne štúdie bajkalskej Ázie" (Ulan-Ude, 2010); V medzinárodná vedecko-praktická konferencia „Priority a črty rozvoja regiónu Bajkal“ (Ulan-Ude, 2011); X medzinárodno-praktická konferencia "Problematika botaniky Južnej Sibíry a Mongolska" (Barnaul, 2011); IV. All-ruská konferencia „Nové pokroky v chémii a chemickej technológii rastlinných materiálov“ (Barnaul, 2009); XVI. Medzinárodná konferencia študentov, doktorandov a mladých vedcov "Lomonosov-2009" (Moskva, 2009); XV. Medzinárodná ekologická študentská konferencia "Ekológia Ruska a priľahlých území" (Novosibirsk, 2010); II All-ruská vedecko-praktická konferencia študentov, absolventov a mladých vedcov "Technológie a vybavenie chemického, biotechnologického a potravinárskeho priemyslu" (Biysk, 2009); Celo ruská vedeckovýskumná konferencia „Vegetácia

Región Bajkal a priľahlé územia “(Ulan-Ude, 2011); V školský seminár mladých vedcov Ruska „Problémy trvalo udržateľného rozvoja regiónu“ (Ulan-Ude, 2009); regionálna mládežnícka vedeckovýskumná konferencia s medzinárodnou účasťou „Environmentálne šetrné technológie a materiály šetriace zdroje“ (Ulan-Ude, 2010).

Práca bola vykonaná v rámci výskumných projektov: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Štúdium biogenetických modelov biosyntézy biologicky aktívnych zlúčenín endemických rastlín strednej Ázie" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Chemické zloženie rastlín ako indikátor stav ekosystémov oblasti Bajkal “(2008-20 Yugg,); projekt interdisciplinárnej integrácie č. 93 „Rozvoj výskumu v oblasti lekárskej chémie a farmakológie ako vedeckého základu pre vývoj domácich drog“; spoločný projekt s Akadémiou vied v Mongolsku „Získanie nových lipo- a nanosomálnych foriem liekov s použitím prírodných surovín“; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilita mladých vedcov" (2010), 11-03-90705-mob_st vedecká práca (školenie) mladých ruských vedcov vo vedúcich vedeckých organizáciách Ruskej federácie 2011 (2011).

Publikácia. Podľa výsledkov bolo publikovaných 17 vedeckých prác, z ktorých 3 boli publikované v periodikách odporúčaných Vyššou atestačnou komisiou Ministerstva obrany a vedy Ruskej federácie.

Rozsah a štruktúra diplomovej práce. Disertačná práca je prezentovaná na 172 stranách písaného textu a pozostáva z úvodu, prehľadu literatúry (1 kapitola), experimentálnej časti (4 kapitoly), všeobecných záverov, zoznamu referencií a aplikácií. Práca je ilustrovaná 37 tabuľkami a 61 obrázkami. Bibliografický index obsahuje 139 zdrojov, z toho 42 zahraničných.

V úvode je opodstatnená relevantnosť témy, formulovaný účel a ciele výskumu, prezentovaná vedecká novosť a praktický význam práce.

Prvá kapitola (prehľad literatúry) prezentuje údaje o chemickom zložení, spektre farmakologickej aktivity, použití rodu Artemisia L. v tradičnej a modernej lekárskej praxi.

Druhá kapitola (materiály a metódy) prezentuje údaje o predmetoch štúdia, použitých metódach, prístrojoch a reagenciách, ďalšie metodické informácie.

Tretia a štvrtá kapitola poskytuje údaje o štúdii anatomických a diagnostických znakov Severs S a jedného roka. Metódou

UV spektrofotometria stanovila celkový obsah flavonoidov a tanínov v predmetoch štúdia. S pomocou GC-MS sa skúmalo kvalitatívne a kvantitatívne zloženie éterického oleja a mastných kyselín paliny. Metóda HPLC-MS stanovila kvalitatívny a kvantitatívny obsah flavonoidov. Elementárne zloženie rastlín sa určilo metódou AAS. Bola vyvinutá a navrhnutá technika kvantifikácie obsahu artemisinínu. pomocou HPLC-MS. Okrem toho sme skúmali chemické zloženie éterických olejov z piatich druhov polynyas, ktoré sa najčastejšie vyskytujú na území Burjatska a Mongolska - webového pálenia Gmelin Artemisia gmelinii. et Stechm., palina, sivá Artemisia glauca Pall, ex Wild, palina, Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., Sievers palina Artemisia sieversiana Willd. a Artemisia annua L.

V piatej kapitole sú uvedené údaje o štandardizácii bylinky Sivers a P. jednoročného, navrhnutého ako sľubné zdroje chamazulénu a artemisinínu.

Hlavný obsah práce

Objekty a metódy výskumu. Predmetom štúdie boli vzorky trávy z Sivers a ročné obce zozbierané v rôznych okresoch Republiky Burjatsko (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) z Irkutskej oblasti (ostrov Olkhon) a Mongolska (Selenginsky Aimak) od roku 2008 do roku 2011

Mikroskopická analýza bola vykonaná v súlade s článkom "Technika mikroskopickej analýzy" (GF XI, číslo 2) na mikroskopoch Mikmed (Lomo, Rusko) s okulárom 10x; šošovky 4x, 10x, 40x a MS-300 (TFXS), Fluorescent System Set (Micros, Rakúsko) s okulárom 10x; šošovky 4x, 10x, 40x. Výnos surovín bol určený metódou účtovníctva.

Extrakcia éterického oleja sa uskutočnila hydrodistiláciou, extrakty sa získali extrakciou ultrazvukom, extrakciou CO2 a maceráciou.

Štúdium kvalitatívneho a kvantitatívneho zloženia týchto objektov sa uskutočnilo nasledujúcimi spôsobmi - GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV spektrofotometria a AAS. Chromato-hmotnostná spektrometrická analýza sa uskutočnila na plynovom chromatografe Agilent 6890 s kvadrupólovým hmotnostným spektrometrom HP MSD 5973N (Agilent Technologies, USA; stĺpce: HP-5ms, g = 0,25 mm, hrúbka filmu 0,25 μm (kopolymér - 5%, difenyl). - 95% dimetylsiloxán) a DBWax s vnútorným priemerom 0,25 μm, nosný plyn - hélium, g) prietok 1–1,5 ml / min; HPLC-MS analýza sa uskutočnila na vysoko výkonných kvapalinových chromatografoch Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) a Agilent 1200 (Agilent Technologies,

USA) s hmotnostne selektívnym detektorom „LCQ Advantage MAX“ („iónová pasca“) značky „Finnigan“ (Thermo Scientific, USA) a s tandemovým hmotnostným spektrometrickým detektorom („iónová pasca“) 6330 (Agilent Technologies, USA), metóda ionizačný elektrosprej; podmienky: Hypersyl Gold Cl8, 5 mikrónov, 150 x 4 mm kolóny (Thermo electronic corporation, USA) a Zorbax Eclipse C18, 5 mikrónov, 4,6 x 150 mm (Agilent Technologies, USA), prietoková rýchlosť eluentu 0,5 ml / min. TLC analýza sa uskutočnila na doskách Sorbfil PTSH-P-A-UV (Imid Ltd, Rusko); BC analýza sa uskutočnila na papieri FN 6 (Filtrak, Nemecko); Absorpčné spektrá sa zaznamenávali na spektrometri StellarNet Green Waiv (StellarNet Inc, USA), AAC analýza sa uskutočnila na spektrofotometri SOLAAR MB (Thermo Scientific, USA) a Varían model AA240 (Varian, Rusko).

Štatistické spracovanie experimentálnych údajov sa uskutočnilo metódou variačno-štatistickej analýzy. Časť údajov bola spracovaná CIM (softvérový balík Sirius verzia 6.0, Systémy na rozpoznávanie vzorov, a / s, Nórsko).

Farmakognostické vlastnosti byliny P. Sivers a P. z leta. Nasledujúce ukazovatele kvality liečivých surovín. Pestuje trávnatú trávu. Celé suroviny. Pevné alebo čiastočne listnaté vrcholy kvitnúcich stoniek nie dlhšie ako 45 cm, neobsahujúce hrubé časti kmeňa. Kmeň pubescentný, rovný, rebrovaný a rozvetvený. Radikálne a stredné listy sú stopkaté, široko trojuholníkové, trojnásobne zrezané, podlhovasté ploché rezy, 1,4 - 2,5 cm dlhé, 0,1 - 0,5 cm široké, koše polguľovité, priemer 0,4 - 0,6 cm, široké panikulovať kvetenstvo. Okrajové piestové kvety (okolo 18). Kvety bisexuálne, početné, s lievikovito tvarovanou korulou.

Trávny palina ročný. Celé suroviny. Pevné alebo čiastočne listnaté vrcholy kvitnúcich stoniek nie dlhšie ako 50 cm, neobsahujúce hrubé časti stonky. Stonka je holá, rovná, ryhovaná, zelená na začiatku vegetačného obdobia, tmavo fialová na konci. Listy listov dolného a stredného kmeňa sú vajcovité alebo oválne, dlhé 1,5-7,0 cm na stopke, eliptické dĺžky, bez krídel, trikrát nadmerne vytlačené do širokých segmentov, segmentov a segmentov, dlhé 0,5 až 0,8 cm, nie široké viac ako 0,2 cm Koše s priemerom približne 0,2 cm v kvetinárstve panikúl.

Pri anatomickej štúdii trávy P. Sivers a P. jeden rok sa identifikovalo množstvo anatomických a diagnostických znakov. Štruktúra listov paliny je uvedená v tabuľke 1. Stonka pstruha Sivers je hrubá, podlhovasté epidermálne bunky.

Existujú esenciálne olejové žľazy, vlasy v tvare T a zaoblené stomatálne bunky. Stonka má štruktúru typu zväzku. V rebrách sú oblasti štíhle. Kolaterálne lúče usporiadané v kruhu sú charakterizované silne vyvinutým sklerenchymom. Dobre značený endoderm, pozostávajúci z veľkých, tenkostenných buniek kruhového tvaru, tesne priliehajúcich k sebe.

Charakteristika anatomickej štruktúry listov p. Sivers a p.

Pestuje palina epidermis palina ročné

horná rovná stena

spodná stena vinutia nízka

typu zariadenia Ustigichesky hornej anomocytovej

nižšia anomocytová, stomata viac ako na hornej strane listu

stomata oválneho tvaru so šošovkovými stomatálnymi bunkami

Charakteristiky hustých chlpov chlpov s vlasmi v tvare T, ktoré pozostávajú z dvoj-, štvorbunkových nôh a viacbunkových chĺpkov, sú dva typy chlpov - hviezdicové a tvaru T s mnohobunkovou nohou

Štruktúry obsahujúce terpenoidy sú mnohobunkové, veľké esenciálne olejové žľazy. schizogénne nádoby a nespecializované parenchymálne bunky

v mieste jednoročných, drážkovaných, takmer holých kmeňových, predĺžených epidermálnych buniek. V stonke jedného roka, rovnako ako v stonke s. Sivers, puchkovský typ štruktúry, sú esenciálne olejové žľazy, zriedka chlpy a oválne stomatálne bunky; V oboch typoch paliny sú epidermálne bunky na korune trubicovitých kvetov tenkostenné, podlhovasté so špicatými koncami, charakterizované prítomnosťou veľkého počtu esenciálnych olejových žliaz a neprítomnosťou chĺpkov.

Merchandisingové ukazovatele boli vytvorené na niekoľkých sériách surovín:

Pestuje trávnatú trávu. Vlhkosť (nie viac ako 7%), celkový popol (nie viac ako 11%), popol nerozpustný v 10% kyseline chlorovodíkovej (nie viac ako 2%), extrakčné látky (nie menej ako 33%), listy hnedé a sčernalé (nie viac ako 5%) ), organické nečistoty (nie viac ako 2%), minerálne nečistoty (nie viac ako 0,5%).

Trávny palina ročný. Vlhkosť nie viac ako 7%, celkový popol (nie viac ako 9%), popol nerozpustný v 10% kyseline chlorovodíkovej (nie viac ako 1%), extrakčné látky (nie menej ako 42%), listy hnedé a sčernalé (nie viac ako 5%), organická nečistota (nie viac ako 2%), minerálna nečistota (nie viac ako 0,5%).

Podľa výsledkov predbežnej fytochemickej analýzy sa v tráve Sivers a P. našli esenciálne oleje, flavonoidy, taníny, kyseliny hydroxyškoricové, kumaríny, mastné kyseliny a seskviterpénové laktóny.

Zásoby Sivers a P. jedného roka. Tabuľka 2 poskytuje údaje o výnosoch, biologických (BZ) a prevádzkových rezervách (EZ) Sivers a ročných, rastúcich v rôznych oblastiach Burjatska.

Zásoby surovín s. Sivers a p. Jednoročné v oblastiach Burjatska

úrodná plocha (g / m2) celkový E prerastanie, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env. Gusinoozersk city 58.0 ± 4.1 0.8 530.0 398.4

env. a. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 154,4 116,0

env. a. Boráty 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

env. s Tapharom 500,0 ± 26,3 0,5 2763,0 2237,0

env. a. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env. Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

Kabansky okres 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Tunkinsky District 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

Pribaikalsky District 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Okres Kurumkansky 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

env. a. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

env. Populácia 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

env. a. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

Kabansky District 400,0 ± 27,1 30,0 136260,0 103740,0

Produktivita nadzemnej časti paliny Sivers a ročného p. V skúmaných húštinách sa pohybuje od 33,8 ± 2,4 do 500,0 ± 32,5 g / m2 a od 39 ± 2,1 do 500 ± 46,2 g / m2. Biologické a prevádzkové rezervy nadzemných častí skúmaných rastlín sú 154,4-97320,0 kg a 116,0-73680,0 kg (palina Sivers), 1,497,6177720,0 kg a 1238,4-122280,0 kg (ročné paliny).

Chemické štúdium byliny P. Sivers a P. z ročných Flavonoidov. Celkový kvantitatívny obsah flavonoidov bol určený všeobecne akceptovanou metódou spektrofotometrického stanovenia v tráve Sivers a P. annuals, v zmysle luteolín-7-glukozidu v rôznych fázach vývoja rastlín (vegetácia, pučanie, kvitnutie, plodenie). Najvyšší obsah flavonoidov bol stanovený vo vzorkách Severs a jednoročných vzoriek odobratých vo fáze pučania - 0,68 a 0,66%, čo je najnižšia - v surovinách zozbieraných vo fáze plodenia - 0,31% a 0,38% (tabuľka 3).

Kvantitatívny obsah množstva flavonoidov vyjadrený ako luteolín-7-glukozid v tráve P. Sivers a v tráve P. jeden rok v závislosti od vegetačnej fázy

fáza vývoja rastlín, množstvo flavonoidov, vyjadrené ako luteolín-7-glukozid (%)

Palivové drevo Pestuje palinu ročne

vegetácia 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

pučanie 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

kvitnutia 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

plodenie 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

Metódou HPLC-MS boli zistené nasledujúce flavonoidy: rutín, luteolín-7-glukozid, chryo-eriol, kvercetín v tráve Sivers a v tráve jednoročnej (Obr. 1).

Obr.1. Chromatogram flavonoidov a P. Sivers, P. jeden rok.

Metóda externého štandardu bola použitá na stanovenie kvantitatívneho obsahu rutínu, chryseriolu, quercetínu v tráve Sivers av tráve jednoročného jedince (tabuľka 4).

V obidvoch typoch paliny je v najväčšom množstve obsiahnutý luteolín-7-glukozid 0,04–0,08% (Sivers) a 0,88–1,77% (n. 1-ročný), quercetín 0,001% (Sivers) a 0,0070,009% (n. ročné).

Kvantitatívny obsah flavonoidov (HPLC-MS)

Kolekcia potočníkov Flavonoid (%)

rutín quercetín luteolín-7-glukozid

Ivolginsky okres, okr. a. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Ivolginsky okres, okr. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

FLY je jeden rok starý a Ivolginsky okres, okr. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Kabansky okres, okr. a. Šváb 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Mastné kyseliny. Vzorky paliny obsahujú 8 až 13 mastných kyselín. Bežné pre oba druhy sú kyseliny palmitové (16: 0), kyselina linolová (18: 2p6), kyselina linolénová (18: ZpZ) v množstve 56,87-82,67% (celkových mastných kyselín) v Severs, 58,36-67,19% v 1 rok (celkových mastných kyselín). Okrem týchto kyselín obsahuje významné množstvo 10-oktadekénovú kyselinu (18: 1p8) od 3,64% do 11,65%. Tiež vo všetkých vzorkách boli detegované 10-metyl-undekánové (¡12: 0) a 12-metyl-tetradekánové (a 15: 0) kyseliny, ktorých obsah nepresahuje 1%. Chromatogramy sú znázornené na obr.

Obr. 2. Chromatogramy mastných kyselín (a) p. Sivers a (b) p. Jeden rok (I - (16: 0), 2 - (18: 2P6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1п8) ).

Elementárna kompozícia. V tráve p. Sivers, ktorá rastie v rôznych oblastiach Burjatska, je obsah vápnika 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, horčík - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Najvyšší obsah vápnika a horčíka je zaznamenaný vo vzorkách odobratých v okrese Kurumkansky, najnižšom obsahu horčíka v surovinách z okresu Tunkinsky a vápnika v rastlinách zozbieraných v okrese Selenginsky. Železo sa väčšinou nachádza v rastlinách z Kurumkanského regiónu

(141,25 ± 12,13 mg / kg), menej - zo okresu Selenginsky (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Obsah zinku sa pohybuje od 23,73 ± 1,56 do 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Pušky a od 55,32 ± 0,83 do 66,50 + 0,89 mg / kg je jeden rok starý, čo je prijateľné pre normálne fungovanie biochemických procesov. Obsah medi je 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9.37 + 0.18-13.48 + 0.44 mg / kg - jeden rok starý (požadované množstvo je od 5 do 30 mg / kg). Nikel v tráve Seabera obsahuje 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, čo zodpovedá potrebe rastliny 0,1 až 5 mg / kg. Obsah kobaltu v zariadení by nemal presiahnuť 1 mg / kg, olovo - 10 mg / kg, kadmium - 0,2 mg / kg, chróm - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). V Sivers p. Obsah kobaltu je menší ako 0,3 mg / kg, olovo je 3,19 ± 0,11 mg / kg, v s. Jeden rok starý - 0,59 ± 0,02 mg / kg, kadmium - 0,18 ± 0,02 mg / kg, chróm - 0,76 ± 0,02 mg / kg vo všetkých vzorkách. Obsah makro- a mikronutrientov je teda v koncentráciách, ktoré sú normálne a postačujú pre tok vitálnych funkcií pre rastliny.

Pestuje pelyňový bylinný olej. Esenciálny olej z rastlín bol izolovaný liekopisným spôsobom č. V rôznych vzorkách p. Sivers obsah esenciálneho oleja sa pohybuje od 0,1 do 1,9%. V éterických olejoch Sivers, ktoré rastú v rôznych častiach Burjatska, bolo identifikovaných viac ako 80 zlúčenín.

Skúmali sme zloženie éterických olejov izolovaných z trávy pstruhov Sivers, ktoré rastú v rôznych častiach Burjatska

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4.9),

Tunkinsky (5), okresy Zakamensky (8)), región Irkutsk (ostrov Olkhon) (6) a Mongolsko (7). Najvyšší výnos esenciálneho oleja je v potočníku Sivers, ktorý rastie v Tunkinsky a Kurumkansky (0,4%). Minimálne množstvo oleja bolo izolované z rastlín zozbieraných na území Zakamensky, Pribaikalsky a Mongolska (0,1%) (Obr. 3).

Študovala sa dynamika akumulácie esenciálneho oleja v závislosti od fázy vývoja rastliny (Obr. 4). Výsledky ukázali, že v najväčšom množstve sa olej akumuluje vo fáze kvitnutia (0,6%), v

Obr. 3. Výťažok esenciálneho oleja p.

fázy pučania a plodenia akumulujú rovnaké množstvo esenciálneho oleja (asi 0,3%).

1- 1,8-dane-I-terpineal-4 3-p-farmaceutický '1 ■ sishna-4,11-dnen

Obr. 5. Chromatogram esenciálneho oleja p.

Obr. 4. Výťažok esenciálneho oleja p.

Sivers v rôznych fázach vývoja rastlín (v období pestovania, b - pučanie, c - kvitnutie,

Všetky zložky esenciálneho oleja možno rozdeliť do dvoch skupín - konštantná, to znamená, že sa nachádzajú v oleji vo všetkých fázach vývoja rastlín a sporadicky sa vyskytujú (menej). Vo všetkých vzorkách éterického oleja Sivers, bez ohľadu na oblasť pestovania rastlín, 1,8-cineol (2,34–22,57%), terpineol-4 (0,964,70%), germacrén E (8,66-12,36%), P-farnezen (0,64 až 5,17%), Selina-4,11-dién (0,97 až 4,66%), Neril-2-metylbutanoát (4,80 až 8,79%) a Chamazulén (0,60 až 25,36%) (Obr. 5).

Esenciálne oleje, izolované z rastlín rastúcich v stepných oblastiach, v okrese Pribaikalsky (25,36%), obsahujú najmenšie množstvo hamazulénu, a najmenšie - v okrese Zakamensky (0,60%).

V zložení éterického oleja izolovaného z rastlín v rôznych fázach vývoja - vegetácie, pučania, kvitnutia a plodenia, bolo identifikovaných 54 zlúčenín. Konštantnými zložkami sú 1,8-cyneol, linalool, terpineol-4, a-terpineol, p-farnezen, selina-4,11-dién, chamazulén.

Obsah chamazulénu sa pohybuje od 0,20 do 24,69% vo fáze vegetácie, od 21,34 do 61,91% v začiatočnej fáze, od 1,53 do 34,42% vo fáze kvitnutia, od 10,87 do 20,64% vo fáze plodenia. Súbor sporadicky sa vyskytujúcich zložiek je signifikantný (až 40 zlúčenín) a zároveň nízko kvantitatívny obsah, preto je ťažké určiť závislosť ich zloženia na fáze vývoja rastliny.

Na posúdenie vplyvu vývojovej fázy na zložky oleja bol použitý CIM (Obr. 6).

Obr. 6. GK model kompozície

éterický olej z vývojovej fázy Sivers (I-vegetácia, 2-pučanie, 3-kvitnutie, 4-rodenie)

toto je jedna z analýz

multidimenzionálne dáta, ktoré umožňujú alokovať skryté premenné vo veľkých dátových poliach a analyzovať vzťahy,

existujúceho systému. Cieľom metódy hlavného komponentu je nahradiť pôvodný popis vzoriek pomocou premenných p pre novú formu reprezentovanú v priestore hlavných komponentov (Esbenson, 2010).

Na modeli GK je možné rozlíšiť oddelené oblasti od seba oddelené a zodpovedajúce rôznym fázam vývoja pstruha Sivers, čo naznačuje, že zloženie masla v rôznych fázach vývoja sa líši v obsahu minoritných zlúčenín.

V rôznych fázach vývoja Sivers sa teda kvalitatívne zloženie éterického oleja zhoduje v konštantných a líši sa v minoritných zlúčeninách.

Štúdia o fázach vývoja rastlín ukázala, že najväčšie množstvo chamazulénu v esenciálnom oleji Seversa sa koncentruje vo fázach pučania a kvitnutia, zatiaľ čo akumulácia oleja vo fáze kvitnutia je väčšia ako vo fáze rastu. Počas týchto fáz sme preto skúmali zvláštnosti akumulácie éterických olejov v rôznych častiach rastliny (Obr. 7).

O fáze budovania V období kvitnutia

Obr. 7. Výťažok esenciálneho oleja v rôznych častiach Sivers.

extrahovateľný éterický olej z rôznych častí rastlín v štádiu kvitnutia ukázal, že kvetenstvo (koše) sa vyznačuje najvyšším výnosom, listy sú menšie a stonky sú minimálne. Vo fáze

pučanie v tráve P. Sivers je zo všetkého najviac obsiahnutý olej v púčikov, o niečo menej v listoch a minimálne množstvo oleja v stonkách.

Analýza esenciálneho oleja z rôznych častí rastliny odhalila, že zloženie oleja získaného z kvetov a trávnych pukov Sivers je najrôznorodejšie, je viac ako 70 zložiek, potom viac ako 40 zložiek z listov a menej ako všetky zlúčeniny v oleji extrahovanom zo stoniek sú približne 20 komponenty. Konštantnými zložkami vzoriek esenciálnych olejov, bez ohľadu na ich umiestnenie, sú 1,8-cyneol, linalool, terpineol-4, germacren 13, a-terpineol, a-bisabolol a chamazulén (tabuľka 5).

Nepretržité komponenty oleja Sivers Wormwood Essential Oil

zložiek zložiek v% celého oleja

fáza fázy kvitnutia

kvetenstvo listy stonky púčiky listy stonky

1,8-cineol 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpineol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5.86

Chamazulene 6.23 23.02 37.11 7.81 21.17 3.51

Analýza ukázala, že v rôznych oblastiach rastu, v rôznych fázach vývoja a v rôznych častiach Seversa, sa kvalitatívne zloženie éterického oleja zhoduje konštantne a líši sa v sporadicky sa vyskytujúcich zlúčeninách.

Esenciálny olej z paliny ročnej byliny. Ako v prvom prípade, výber esenciálneho oleja sa uskutočnil liekopisnou metódou č. Chemické zloženie p. Ročných esenciálnych olejov predstavuje 40 zložiek. Konštantnými zložkami sú artemisia ketón (10,24–14,62%), caryophyllen (9,93–10,71%), germacrén B (3,53–7,82%), p-selenén (21,75–29,46%), oxid karyofilénu (4,44–14,31%) (Obr. 8).

V rôznych štádiách vývoja rastlín sa z bylinky paliny extrahuje 0,5 až 0,7% esenciálneho oleja. Najvyšší výťažok esenciálneho oleja vo fáze kvitnutia (0,7%) (Obr.9).

Vo všetkých fázach vývoja rastlín sú v esenciálnom oleji obsiahnuté artemisia ketón, karyofilén (3-selén, oxid karyofylén), ktorý sa mení v rôznych fázach vývoja rastlín. a oxid karyofilénu - vo fáze kvitnutia.

3. Chromatogram esenciálneho oleja p.

Obr. 9. Výťažok esenciálneho oleja p. Ročný v rôznych fázach vývoja rastlín (in-vegetácia, b-bud, c-kvitnúce, p-fruiting).

Esenciálne olejové žľazy sú v rastline nerovnomerne rozložené, preto z rôznych častí rastliny možno rozlišovať esenciálne oleje, ktoré sa kvantitatívne aj kvalitatívne líšia.

Boli určené zvláštnosti akumulácie éterických olejov vo fáze kvitnutia v rôznych častiach ročného pstruha (obr. 10).

Viac ako 60 zlúčenín bolo nájdených v éterických olejoch z rôznych častí rastliny. konštantný

komponenty pre oleje z kvetenstvo, listy, stonky sú artemisia alkohol, p-karyophillen, oxid

Hlavnou zložkou ročného esenciálneho oleja je artemisia keton - nenachádza sa v oleji zo stoniek, hoci je polovica v oleji z kvetov (49,14%) a takmer tretina listov (29,76%).

Analýza esenciálnych olejov ukázala, že v rôznych oblastiach rastu, v rôznych fázach vývoja av rôznych častiach n. Ročnej trávy, rovnako ako n. Sievers trávy, kvalitatívne zloženie éterického oleja je rovnaký v konštantných a rôznych v sporadicky sa vyskytujúcich zložiek.

Vývoj metódy kvantitatívneho stanovenia artemisinínu v palube ročnou metódou HPLC-MS

Výber podmienok pre kvantitatívnu extrakciu artemisinínu z ročného paliny. Vypracovať kvantitatívnu metodiku

1 z obr. 10. Výťažok esenciálneho oleja v rôznych častiach ročného (1-kvetenstvo, 2-listy, 3-stonky).

Vybrali sa artemisinínové stanovenia v tráve P. jednoročných extrakčných podmienok, pri ktorých extrakcia artemisinínu dosahuje svoju maximálnu hodnotu. Analyzovali sa extrakty získané metódami macerácie, ultrazvukovej extrakcie a subkritickej extrakcie CO2. Ako extrakčné činidlá sa použili rôzne rozpúšťadlá (tabuľka 6). Obsah artemisinínu v extraktoch oddelených extrakciou ultrazvukom a maceráciou s použitím rôznych rozpúšťadiel nie je významne odlišný (0,038-0,040%). Najväčšie množstvo artemisinínu (0,054%) je obsiahnuté v extrakte získanom počas subkritickej extrakcie CO2.

Metódy a parametre na extrakciu extraktov z trávy paliny jednoročnej rôznymi extrakčnými metódami t

extrakčná metóda extrakčný čas extrakčný čas / extrakčné parametre obsah artemisinínu v%, vyjadrené ako a.s.s.

etanol 24 hodín / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), T = 25 ° C 0,040 ± 0,002

Maceračný etanol 48 h / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), T = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Hexán 24 h / vzorka: pomer rozpúšťadla (1: 5), T = 25 ° C 0,039 ± 0,002

etylacetát 15 minút / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), frekvencia ozvučenia 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

etanol 5 minút / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), frekvencia zvuku 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ultrazvuková extrakcia etanolu 10 minút / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), frekvencia zvuku 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

etanol 15 minút / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), frekvencia zvuku 50 KHz, T = 25C, C 0,039 ± 0,002

etanol 20 minút / pomer surovín: rozpúšťadlo (1: 5), frekvencia zvuku 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

Extrakcia CO2 pri prietoku CO2 24 h.1 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Zo všetkých navrhovaných metód extrakcie je optimálna extrakcia ultrazvukom (extrakcia etanolom), pretože táto metóda je rýchla (doba extrakcie 15 minút) a je dostupná prístrojovým vybavením.

Metóda kvantitatívneho stanovenia artemisinínu.

Vývoj techniky kvantitatívneho stanovenia artemisinínu v bylinkách ročnej bol uskutočnený pomocou HPLC-MS. Použili sme Agilent 1200 HPLC s MC - detektorom ("iónová pasca") 6330, ionizačnou metódou - elektrosprejom. Elúcia sa uskutočňovala v izokratickom režime (50% (A): 50% (B)), zloženie východiskového pufra (A) - vodného roztoku kyseliny mravčej (pH = 3) + 2 ml nasýteného roztoku octanu amónneho, elučného pufra (B) - 100%. acetonitril. Objemová prietoková rýchlosť eluentu je 0,5 ml / min, objem injektovanej vzorky je -25 μl. Ióny sa zaznamenávali v režime monitorovania pozitívne nabitých iónov (SRM) s hmotnosťou 300 (v dôsledku pridania iónu NrH4 do molekuly artemisinínu), šírky okna (299301) m / z. Výsledky boli potvrdené tandemovou hmotnostnou spektrometriou, dcérsky ión (MS2) s hmotnosťou 223 m / z bol získaný z materského iónu (MS) s hmotnosťou 300 m / z.

Koincidencia retenčných časov a hmotnostných spektier artemisinínu, stanovená v tráve jedného roka, s použitím roztoku CO uvedenej zlúčeniny, umožňuje konštatovať, že čistá zlúčenina je identická s čistým artemisinínom (obr. 11, 12).

Obr. 11. Chromatogram CO artemisinínu a P. ročného extraktu.

iv ix язтжяауат ассс »

Obrázok 12. Hmotnostné spektrá a) artemisinínu obsiahnutého v n. Ročnej tráve, b) artemisinínu CO.

Na chromatografickú hmotnostnú spektrometriu sa použila absolútna kalibračná metóda na kvantitatívnu analýzu. Na stanovenie koeficientu kalibračnej krivky sa pripravilo niekoľko (aspoň 20) kalibračných roztokov artemisisinínu. Príprava roztokov sa uskutočnila nasledovne: Odvážilo sa 5 x 10 "3 g artemisinínu, umiestnili sa do 50 ml odmernej banky, pridalo sa 25 ml acetonitrilu. Obsah banky

dôkladne premiešajte až do úplného rozpustenia, potom sa objem v banke priviedol na značku destilovanou vodou. Vykonaná analýza pri rôznom objeme injektovanej vzorky od 1 do 40 μl. Bola meraná plocha píku v chromatogramoch. Podľa získaných údajov bola vytvorená kalibračná krivka (obr. 13). Hodnoty plochy píku boli vynesené na osi osi a zodpovedajúce hodnoty obsahu artemisinínu (g) boli vynesené na os osi x.

Zo získaných údajov bol vypočítaný koeficient kalibračnej krivky: к = Б / х, kde к je koeficient kalibračnej krivky, 5 je plocha píku analyzovaného roztoku, х je obsah artemisinínu (g)

Koeficient kalibračnej krivky (k) je definovaný ako aritmetický priemer koeficientov k.

Obr. 13. Stupnica na určenie obsahu artemisinínu.

Obsah artemisinínu v jednoročnom extrakte z paliny bol určený vzorcom: C = 5 / c, kde 5 je plocha píku artemisinínu v analyzovanom roztoku a k je koeficient kalibračnej krivky. Metrologické údaje o stanovení koeficientu kalibračnej krivky (k) sú uvedené v tabuľke 7.

Metrologické charakteristiky výpočtu koeficientu kalibračnej krivky artemisinin

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1,32 * 10 m 1,84 * О15 4,25 * 10 "95 2,09 1,28 * 10" 1,97 1,90 * 10 "

Výsledky kvantitatívneho stanovenia artemisinínu v ročnom extrakte z paliny sú uvedené v tabuľke 8.

Výsledky kvantitatívneho stanovenia artemisinínu v extrakte z paliny jednoročnej metódy HPLC-MS

Metrologické charakteristiky (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "'0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "

Vyvinutá metóda stanovila kvantitatívny obsah artemisinínu v tráve n-ročný vo fáze kvitnutia (tabuľka 9). Technika je validovaná - špecifickosť, presnosť potvrdená.

Obsah artemisinin v tráve palina ročné

Oblasť Artemisinin a dátum zberu (%)

Ivolginsky okres, 10 km od Sotnikovo, 08/12/2010 0.054 ± 0.003

Ivolginhiy rn, 10 km od Sotnikovo, 22.8.2011 0.027 ^.001

Ivolginsky okres, okr. a. Oriole, 08/19/2011 0,069 ± 0,004

Kabansky okres, okr. a. Tarakanovka, 08.22.2011 0.023 ± 0.001

Vo vzorkách odobratých v regióne Ivolginsky, v blízkosti mesta. T Oriole obsahuje najvyššie množstvo artemisinínu (0,069%), najmenší - vo vzorkách z Kabansky District, okr. a. Šváb (0,023%). Bolo zistené, že najväčšie množstvo artemisinínovej rastliny sa sústreďuje vo fáze kvitnutia - 0,039%, najmenšia - vo fáze vegetácie a pučania - od 0,006 do 0,007%. Artemisinínové kvetenstvo obsahuje - 0,029%, o niečo menej - 0,021% v listoch a minimálne množstvo v stonkách je 0,007% (tabuľka 10).

Obsah artemisinínu v tráve roľníka v závislosti od vegetačnej fázy v rôznych častiach rastliny t

vývojovej fázy elektrárne

vegetácie nádejný kvitnúce listy kvetenstvo stonky

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Optimálnym časom na zber trávy ročného paliny je teda fáza kvitnutia a odporúča sa zbierať celú časť antény.

Všetky získané výsledky sú zahrnuté v projektoch FS na tráve potoka Sivers a byliny ročného paliny.

1. Boli odhalené hlavné diagnostické znaky trávy Sivers a P. jednoročná tráva, boli vyvinuté numerické ukazovatele potrebné pre normalizáciu surovín. Sú identifikované zásoby Sivers a P., ktoré rastú v rôznych oblastiach Buryatia.

2. Obsah flavonoidov, mastných kyselín, makro a mikroživín v tráve Sivers n av tráve n. Flavonoidy - luteolín-7-glukozid, rutín, kvercetín a chryoeriol boli v týchto rastlinách detekované metódou HPLC-MS. Hlavnými mastnými kyselinami v študovaných typoch paliny sú palmitová, linolová, linolénová, 10% kyselina octadekenová sa nachádza aj vo významnom paline.

3. Zistilo sa, že kvalitatívne zloženie rastlinných esenciálnych olejov zostáva konštantné bez ohľadu na miesto rastu a fázu vývoja. Konštantnými zložkami Sivers sú 1,8-cyneol, terpineol-4, D germacren, p-farnesen, Selina-4,11-dién, neyl-2-metylbutanoát a chamazulén a artemisia ketón, karyofilén, germacrén jeden rok starý D, p-selenén, oxid karyofilný. Akumulácia esenciálneho oleja vo fáze kvitnutia je väčšia (0,7%) ako v začiatočnej fáze (0,3%). Najväčšie množstvo chamazulénu p. Sivers sa akumuluje vo fázach pučania (až 62%) a kvitnutia (až 34%).

4. Stanovili sa podmienky na extrakciu artemisinínu (typ extrakčného činidla, extrakčná metóda, čas extrakcie) z jednoletej byliny a stanovilo sa, že maximálna extrakcia artemisinínu sa dosahuje extrakciou ultrazvukom a prekurzorom CO2. Metóda kvantitatívneho stanovenia artemisinínu bola vyvinutá a validovaná v jednoročnej HPLC-MS metóde (relatívna chyba stanovenia ± 1,21%). Bolo zistené, že najväčšie množstvo artemisinínu v tráve ročnej byliny sa akumuluje počas kvitnutia v kvetenstvách (0,039%).

5. Vypracované regulačné dokumenty pre suroviny - projekt FS „Grass of Sivers wormwood“ a projekt FS „Grass of wormwood one-year“.

Zoznam príspevkov publikovaných na tému dizertačnej práce

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Chemické zloženie éterického oleja Artemisia gmelinii Web. et Stechm, pôvodom zo strednej Ázie / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva a Plant Chemistry.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Chemické zloženie esenciálneho oleja z pižmových bôbov Artemisia sieversiana Willd., Pestované v Burjatsku / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin Štátnej univerzity Buryat. Ser. Chémia-fyzika. - 2009. 3. - str.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Zloženie esenciálneho oleja z pstruhov potoční Artemisia sieversiana Willd., Pestovaných v Burjatsku a Irkutskej oblasti / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin Východo-sibírskeho vedeckého centra sibírskej pobočky Ruskej akadémie vied. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. Zloženie esenciálneho oleja Artemisia sieversiana Willd. v rôznych fázach vývoja rastlín / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Bulletin Východo-sibírskeho vedeckého centra sibírskej pobočky Ruskej akadémie vied. - 2011. - №1 (77). Časť 2. - s.

5. Soktoeva, TE Zloženie zloženie esenciálneho oleja Artemisia glauca Pall, ex Willd. flóra Mongolska / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bulletin mladých vedcov. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - s.

6. Soktoeva, TE Chemické zloženie éterického oleja Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: materiály XVI Intern. Conf. študentov, mladých študentov a mladých vedcov. - Moskva, 2009. - s.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Esenciálny olej z paliny Gmelin flora Burjatsko a Mongolsko / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Nové úspechy v chémii a chemickej technológii rastlinných surovín“: materiály IV. All-Russia. vedecký. Conf. - Barnaul, 2009. - s.

8. Soktoeva, T.E. Zloženie esenciálneho oleja z pstruha Sivers Artemisia sieversiana Willd., Ktorá rastie v republike Burjatsko / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD „Technológie a zariadenia chemického, biotechnologického a potravinárskeho priemyslu“: materiály II Vseross. To vedecky. Conf. študentov, mladých študentov a mladých vedcov. - Biysk, 2009. - s.

9. Pavlova E.T. Chromatografická separácia a kvantitatívne stanovenie zložiek liečiv pomocou HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // „Problémy trvalo udržateľného rozvoja regiónu“: materiály 5. školského seminára pre mladých vedcov Ruska. - Ulan-Ude, 2009. - s. 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Porovnávacia analýza chemického zloženia Artemisia L., rastúca v strednej Ázii / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // „Modemové metódy analýzy dát“ siedmeho zimného simulácie o chemometrii. - Saint-Petersburg, 2010. - s.

11. Soktoeva, T.E. Porovnávacia analýza zloženia éterických olejov polynia rodu Artemisia L. pestovaná v strednej Ázii / TE Soktoeva // "Technológie a materiály šetrné k životnému prostrediu a šetrné voči zdrojom": materiály regiónu, vedecké práce mládeže. Conf. od Intern. účasť. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Éterické oleje z rodu Artemisia L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Vývoj tradičnej medicíny v Rusku: skúsenosti, výskum, perspektívy“: materiály nauchn. Conf. od Intern. účasť. - Ulan-Ude, 2010. - s. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. Zloženie esenciálneho oleja súrodencov paliny Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Aktuálne štúdie o Bajkalskej Ázii“: materiály Intern. To vedecky. Conf, - Ulan-Ude, 2010. - s.

14. Badmaeva, E.E. Zloženie esenciálneho oleja Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess. rastie v Mongolsku / E.E. Badmaeva,

TE Soktoeva // „Ekológia Ruska a priľahlých území“: materiály XV International. environmentálne kon. - Novosibirsk, 2010. - s.

15. Badmaeva, E.E. Zloženie esenciálneho oleja Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Technológie šetrné k životnému prostrediu a šetriace zdroje": materiály Vseross. mládežníckej konferencie od Intern. účasť. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Extrakcia artemisinínu z paliny ročnej Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD „Priority a črty rozvoja regiónu Bajkal“: materiály medzinárodného odboru Vth. To vedecky. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - s.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Chemické zloženie Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Vegetácia regiónu Bajkal a priľahlých území“: materiály od spoločnosti Vseross. To vedecky. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - s. 152-153.

AAS atómová absorpčná spektrofotometria

PBUH absolútne suché suroviny

BAS biologicky aktívne látky

Biologických rezerv GZ

BH papierová chromatografia

Svetová zdravotnícka organizácia WHO

HPLC-MS vysokoúčinná kvapalinová chromatografia

Štátny liekopis GF

Metóda ISC hlavných komponentov

Štandardná vzorka CO

táto chromatografia na tenkej vrstve

Prevádzkové rezervy EZ

SRM Vyberte monitorovanie reakcie

Autor vyjadruje úprimnú vďačnosť vedúcemu štúdia, doc. LD Radnaeva, ako aj Ph.D., docent, senior výskumník Bajkalský inštitút manažmentu prírody Sibírskej pobočky Ruskej akadémie vied Zhigzhitzhapova C.B., doktor chémie, čestný profesor Štátna univerzita Tomsk Ryzhova G.L. o pomoc a podporu pri príprave diplomovej práce.

Bol podpísaný v tlači 11/21/2011 Formát 60x84 1/16. Ofsetový papier. Objem 1,5pech. l. Circulation 100. Objednávacie číslo 67.

Vytlačené v tlačiarni vydavateľstva BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, ul. Sakhyanova, 6.

Obsah Soktoevovej práce, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Kapitola 1. PRESKÚMANIE LITERATÚRY

Súčasný stav výskumu štúdia rodu Artemisia L. t

1.1. Botanické vlastnosti paliny Sivers a 12. ročníka paliny

1.2. Éterické oleje a prírodné azulénové rastliny rodu Wormwood

1.2.1. Chemické zloženie éterických olejov a prírodných azulén 14 rastlín rodu Wormwood

1.2.2. Použitie éterických olejov rastlín rodu Wormwood v medicíne

1.2. Artemisinin: objav, štruktúra a syntéza, fyzikálno-chemické vlastnosti, mechanizmus účinku antiplasmodia

1.3. Zloženie mastných kyselín rastlín rodu Wormwood

1.4. Fenolové zlúčeniny rastlín rodu Wormwood

1.5. Základné zloženie rastlín rodu Wormwood 38 ZÁVERY DO KAPITOLY

KAPITOLA 2. CHARAKTERISTIKA OBJEKTOV A METÓD 41 VÝSKUM

2.1. Objekty štúdia, vzorky surovín - tráva potokov Sivers a 41 bylín z paliny každoročne

2.2. Metódy výskumu

2.2.1. Metódy biologického výskumu

2.2.1.1. Anatomická a diagnostická štúdia

2.2.1.2. Výskum zdrojov

2.2.2. Metódy pre kvalitatívne a kvantitatívne stanovenie 43 biologicky aktívnych látok

2.2.3. Merchandising analýza: Metódy na vytvorenie 50 kvalitných surovín

2.2.4. Metódy štatistického spracovania. Metóda hlavného komponentu.

KAPITOLA 3. FARMAKOGNOSTICKÁ ANALÝZA HERBALOVÝCH HERBALÍSOV CIVERS

3.1. Mikroskopická analýza trávy pstruhov Sivers

3.2. Sibers Wormwood Stocks

3.3. Štúdium hlavných trávnych súrodencov trávy BAS

3.3.1. Kvalitatívny a kvantitatívny obsah zložiek 64 esenciálneho oleja z pstruha Sivers

3.3.1.1. Chemické zloženie a dynamika akumulácie esenciálneho oleja a 64 hamazulena v tráve pstruhov Sivers v rôznych oblastiach Burjatska

3.3.1.2. Zvláštnosti akumulácie esenciálneho oleja a chamazulénu v tráve 65 pstruhov v rôznych fázach vývoja rastlín

3.3.1.3. Nahromadenie menších zložiek esenciálneho oleja trávy 71 Potopí palinu

3.3.1.4. Vlastnosti akumulácie esenciálneho oleja a chamazulénu v tráve 72 Pestuje palinu z rôznych častí rastliny

3.3.2. Kvalitatívny a kvantitatívny obsah flavonoidov a tanínov v tráve pstruhov Sivers

3.3.3. Mastné kyseliny zloženie trávy pstruhov Sivers

3.3.4. Elementárne zloženie bylinného paliny ročné ZÁVERY DO KAPITOLY

KAPITOLA 4. FARMAKOGNOSTICKÁ ANALÝZA HERBÁLNYCH HERBOV 83 JEDNA ROKY

4.1. Mikroskopická analýza bylinného paliny

4.2. Zásoby paliny ročné

4.3. Štúdia hlavného trávneho trávnika BAS

4.3.1. Kvalitatívny a kvantitatívny obsah zložiek esenciálneho oleja v bylinkovom palive

4.3.1.1. Chemické zloženie a dynamika akumulácie esenciálneho oleja v 92 trávach jednoročného paliny z rôznych miest rastu

4.3.1.2. Zvláštnosti akumulácie esenciálneho oleja v tráve paliny ^ ročne v rôznych fázach vývoja av rôznych častiach závodu

4.3.2. Kvalitatívne a kvantitatívne stanovenie flavonoidov trávy 100 palín ročne

4.3.3. Zloženie mastných kyselín bylinného paliny ročného ^ ® *

4.3.4. Základné zloženie bylinné paliny ročné

4.4. Vývoj metódy kvantitatívneho stanovenia artemisinínu v 103 trávach paliny každoročnou metódou HPLC-MS

4.4.1. Výber podmienok pre kvantitatívnu extrakciu artemisinínu zo 103 jednoročných palín

4.4.2. Vývoj techniky na kvantitatívne stanovenie artemisinínu 104 pomocou HPLC-MS

4.4.3. Kvantitatívny obsah artemisinínu v ročnom palive z rôznych miest rastu

4.4.4. Analýza kvantitatívneho obsahu artemisinínu v tráve 107 palina ročne v rôznych fázach vývoja av rôznych častiach závodu

KAPITOLA 5. NASTAVENIE UKAZOVATEĽOV 111 DOBROSŤ SUROVÝCH MATERIÁLOV

5.1. Morfometrické ukazovatele surovín

5.2. Štandardizácia trávnatých súrodencov

5.2.1. Merchandising ukazovatele tráva Sills palina!

5.2.2. Štandardizácia bylinnej byliny Sivers podľa obsahu 115 hamazulelénu v zložení esenciálneho oleja

5.2.3. Zriadenie trvanlivosti trávnika Sivers

5.3. Štandardizácia bylinné paliny ročné ^ ^ ^

5.3.1. Komoditné ukazovatele tráva sagebrush ročné * '^

5.3.2. Štandardizácia bylinnej paliny každoročne na obsah artemisinínu

5.3.3. Stanovenie trvanlivosti bylinné paliny ročné

Úvod do diplomovej práce na tému "Farmaceutická chémia, farmakognózia", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstrakt

Relevantnosť témy. Rastliny rodu Artemisia (palina) sú sľubnými zdrojmi biologicky aktívnych látok, ako napríklad palina obyčajná Artemisia dracunculus L., palina Artemisia absinthium L., palina obyčajná Artemisia vulgaris L. je široko využívaná v ľudovom, tradičnom a potravinárskom priemysle. Artemisia annua L., ročná palina, sa úspešne zaviedla do kultúry v mnohých krajinách av roku 2001 ju WHO odporučila ako hlavný zdroj artemisinínu, prvej línie liečby malárie. Krajiny produkujúce artemisinín dnes poskytujú približne štvrtinu globálnych zdravotných potrieb [1, 2]. Z jednoročného jedince sa izolovalo 137 biologicky aktívnych zlúčenín, vrátane 40 seskviterpénov, 10 triterpénov, 7 kumarínov, 46 flavonoidov, ktoré môžu slúžiť ako základ pre vývoj liekov [3]. V 80. rokoch 20. storočia sa skupina vedcov [4] pokúsila pestovať divo rastúcu časť jednoročnej flóry ZSSR v ULI (Moskva). V súčasnosti sa na Tomskej štátnej univerzite uskutočňujú rozsiahle práce na zavedení prvého ročníka. V Burjatsku n. Ročný je voľne rastúci druh.

Spolu s jednoletým v Burjatsku je široko rozšírený pstruh Sivers Artemisia sieversiana Willd, ktorý je tiež sľubným druhom. V tráve P. Sievers obsahujú flavonoidy, éterický olej, kumaríny [5-8]. Esenciálny olej Seabera je zaujímavý ako zdroj Chamazulene, netoxickej zlúčeniny s protizápalovými, baktericídnymi, regeneračnými účinkami [9, 10].

Cieľ štúdie: Farmakognostická štúdia pižma Sivers Artemisia sieversiana Willd. a palina ročná Artemisia annua L. ako cenné zdroje biologicky aktívnych látok.

Na dosiahnutie tohto cieľa je potrebné riešiť tieto úlohy:

1. Identifikujte anatomické a diagnostické vlastnosti nadzemnej časti Sivers p. A s. Jednoročné stanovte komoditné ukazovatele surovín, vyhodnotte rezervy a možnosť zberu p. Jednoročné a Sivers na území Republiky Burjatsko;

3. vyvinúť metódu na kvantitatívne stanovenie artemisinínu v nadzemnej časti jedného roka;

Vedecká novosť. Boli stanovené hlavné diagnostické znaky trávy Sivers a P. ročné, boli vyvinuté numerické ukazovatele potrebné pre štandardizáciu surovín.

Stanovené ukazovatele kvality BAS zahrnuté v regulačných dokumentoch.

Praktický význam. Rezervy a možný ročný objem obstarávania sídla Sivers a jednoročného vyrovnania na území Republiky Burjatsko (vysporiadanie Siverov - od 0,1 do 73,7 ton ročne a vyrovnanie jedného roka od 1,2 do 122,3 ton ročne).

Bola vykonaná štandardizácia surovín, boli vyvinuté projekty FS - „Sivers Wormwood Herbal“ a „Wormwood One-Year Grass“.

Práca bola vykonaná v rámci výskumných projektov: RFBR: č. 08-04-90202-Monga „Štúdium biogenetických modelov biosyntézy biologicky aktívnych zlúčenín endemických rastlín strednej Ázie“ (2008 - 2009), č. 08-04-9803 7-rsibirya a

Chemické zloženie rastlín ako ukazovateľ stavu ekosystémov regiónu Bajkal “(2008-2010); projekt interdisciplinárnej integrácie №93 "Rozvoj výskumu v oblasti lekárskej chémie a farmakológie ako vedeckého základu pre vývoj domácich drog"; spoločný projekt s Akadémiou vied v Mongolsku „Získanie nových lipo- a nanosomálnych foriem liekov s použitím prírodných surovín“; RFBR: № 10-03-16001-mobzros „Mobilita mladých vedcov“ (2010), №11-03-90705-mobst vedecká práca (vzdelávanie) mladých ruských vedcov vo vedúcich vedeckých organizáciách Ruskej federácie 2011 (2011).

K obhajobe sú vzaté:

• výsledky štúdie anatomickej štruktúry, zásob, kritérií pravosti Sivers a P., rastúcich v Burjatsku;

• výsledky chemickej štúdie biologicky aktívnych látok a ich sezónna dynamika akumulácie;

• výsledky štúdií o štandardizácii nadzemnej časti Sivers p.